(五) 鉴别诊断
与流行性角结膜炎、急性卡他性结膜炎、衣原体性结膜炎相鉴别。
1．流行性角结膜炎：常由腺病毒8、19、37等亚型感染引起。潜伏期5～12天，接触传染，传染性强，可暴发或小范围流行，常年均可见散发病例。可先有上呼吸道感染、发热史。结膜明显充血、水肿，滤泡增生，少数可引起不同程度的结膜下出血。水样分泌物，常伴伪膜形成。耳前淋巴结肿大。起病7～10天内，出现浅层点状角膜炎，2周左右角膜中央出现数目不等的上皮下圆形浸润斑点，影响视力。角膜损害可持续数月或数年后消失或遗留云翳。
2．急性卡他性结膜炎：由细菌感染引起，潜伏期1～2天，常见的致病菌为肺炎链球菌、Koch-Weeks杆菌，流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌等。属接触传染，表现为结膜充血、水肿，粘液脓性分泌物，一般不波及角膜。如由Koch-Weeks杆菌或肺炎链球菌感染，结膜可出现小点状出血。
3．衣原体性结膜炎：由衣原体感染引起的急性滤泡性结膜炎，潜伏期3～4天。表现为眼睑红肿、结膜高度充血、乳头增生、穹隆部布满滤泡。另外也可通过成人衣原体性生殖泌尿系感染的分泌物或污染的游泳池水引起。病程持续数周至数月。
二、治疗
临床上可用抗病毒眼液如0.5％病毒灵眼液，5％吗啉双胍眼液，鱼腥草滴眼液，开始时每小时一次，3天后逐渐减少次数，晚间涂更昔洛韦眼膏或抗生素眼膏。有角膜上皮病变的患者加用表皮生长因子眼液或眼表面润滑剂或人工泪液促进上皮修复及保护上皮。
有前房炎症时加用散瞳剂或非甾体抗炎药。
中药金银花、野菊花、板蓝根、桑叶、薄荷等热熏敷或提取液滴眼对缓解症状有一定疗效。
眼分泌物多时，可用温生理盐水或3%硼酸液清洗结膜囊。
抗生素、磺胺药可以作为预防混合感染或继发细菌感染用药。
三、预后
该病病程呈自限性，自然病程为1～3周，一般预后良好，但偶有出现神经系统并发症。
 
 
附件2
急性出血性结膜炎的实验室检测
一、病毒的分离与鉴定
（一）标本的采集、运送和保存
1．患眼结膜囊泪液、分泌物是分离CA24v、EV70的主要标本。标本采集应在起病1～3天以内。
2. 用灭菌棉拭子涂擦翻转的上、下睑结膜并拭取泪液立即投入装有灭菌生理盐水或Eagle液或0.5%水解乳蛋白Hanks液2mL的小试管中，贴好标签，置冰壶内携至实验室或低温（-20℃～-70℃）冻存。
（二） 病毒分离
1． 取出标本，无菌条件下揉洗棉拭子，压挤出标本液，加10％青霉素、链霉素（原浓度青霉素、链霉素各1万u/mL），置4℃作用4h后用作病毒分离。
2. 细胞培养用生长单层的HeLa细胞或人胚肺二倍体细胞或其他敏感细胞，生长液为10%牛血清Eagle液，含青霉素100u/mL，链霉素100u/mL，pH7.2-7.4。
3．倾去细胞管内生长液。每细胞管接种标本液0.2mL吸附10min。每份标本液接种4个细胞管。加维持液（含2%牛血清的Eagle液，PH 7.2～7.4）0.8mL/管。余标本液置-20℃或-70℃冻存。细胞对照管4管，每管加维持液1.0mL。     37℃温箱静置培养。每日光学显微镜下观察细胞病变。3-4天更换维持液一次，连续观察7天。
4．细胞管出现细胞病变，表现为细胞圆缩、分散、胞浆内颗粒增加，最后细胞自管壁脱落，为分离阳性结果。细胞病变达“+++ - ++++”时，将细胞收留冻存于-20℃或-70℃，备TCID50滴定及病毒鉴定。第1代培养见可疑细胞病变时继续传代，待细胞病变稳定出现后-20℃或-70℃冻存。第1代培养培养7日不出现细胞病变时连续盲传2代，如仍无细胞病变则分离结果为阴性。
（三）病毒TCID50滴定
1．阳性细胞管冻融3次。2000rpm离心10分钟，吸取上清，加 Eagle液10倍系列稀释为10-1至10-8病毒液，各加入细胞板内，每孔25μl，每稀释度4孔细胞。
2．每孔加细胞悬液25μl，同时设细胞对照（25μl稀释液+25μl 细胞悬液）， 37℃培养7天，观察细胞病变。
3．按Reed-Muench法计算出分离病毒株的TCID50。
（四）病毒鉴定（微量中和实验）
1．将CA24v或EV70的标准血清稀释至20个单位（例如：血清效价为1:160时，进行1:8稀释）。
2． 在96孔细胞培养板中每孔加入20个单位的标准抗血清25μl和100个TCID50病毒25μl，37℃作用1小时，最后加入HeLa或其它敏感细胞悬液25μl。同时设以下对照：
（1）病毒滴度核实对照：第一孔加100个TCID50病毒25μl，从第二孔开始进行倍比稀释病毒最后每孔加稀释液25μl 及细胞悬液25μl；
（2）阳性对照：加100个TCID50病毒25μl 、稀释液25μl 和细胞悬液25μl；
（3）阴性对照：加稀释液50μl 和细胞悬液25μl；
（4）阴性血清对照：每孔加 100个TCID50病毒25μl 、不含特异性抗体的血清25μl 和细胞悬液25μl；
（5）将细胞板轻轻摇匀，37℃、5％CO2温箱培养7天。
3．观察细胞病变，以完全病变为判断标准，不发生细胞病变的证明其病毒能被标准血清所中和，以此鉴定病毒。
二、间接免疫荧光试验法
（一）眼结膜细胞涂片
1.用棉拭子取结膜细胞，涂于清洁的玻片上，室温干燥，冷丙酮于4℃固定10min。
2. 一个患者标本作两个涂片，分别用抗CA24v及抗EV70单克隆抗体作间接免疫荧光试验，检查结膜细胞中的病毒抗原。
（二）细胞培养物涂片
1．眼拭子标本接种于细胞培养管中，出现可疑细胞病变时，取其中一管用毛细吸管吹打下细胞，经PBS洗涤做细胞涂片，室温干燥，冷丙酮固定。
2．分别用抗CA24V及抗EV70单克隆抗体作间接免疫荧光试验检查病毒抗原，既可以确定分离是否为阳性，又可以及时鉴定出病毒型别。
（三）间接免疫荧光试验法
1．上述结膜细胞涂片或病毒分离涂片，分别加适当稀释的抗CA24v及抗EV70单克隆抗体，将玻片置于37℃湿盒内30min。
2．取玻片用pH 7.2-7.4的PBS洗涤3次，每次3min-5min。
3．加适当稀释的抗鼠IgG荧光素结合物，置于37℃湿盒内30 min。
4．取出玻片，同上法用P.B.S洗涤3次，加50%中性甘油P.B.S封片镜检，在荧光显微镜下细胞浆内见黄绿色荧光为阳性。